2 × PCR Super Mix (رەڭ بىلەن)
2 × PCR Master Mix تا Ta DNA DNA Polymerase ، dNTP ۋە PCR تەلەپ قىلىدىغان باشقا زاپچاسلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.Master Mix بىزنىڭ خاسلاشتۇرۇلغان مۇقىملاشتۇرغۇچلىرىمىز بىلەن 4 at دە 3 ئاي مۇقىم.ئالدىن ئارىلاشتۇرۇش لايىھىسى ئادەتتىكى PCR ئۈچۈن ئەلالاشتۇرۇلغان بولۇپ ، DNA قېلىپى ۋە پىرىسلاش ئارقىلىق ئىشلىتىشكە تەييار.PCR مەھسۇلاتلىرىغا ئالدىن قاچىلانغان بروموفېنول كۆك بوياق بىلەن ئېلېكتروفورېزغا بىۋاسىتە قاچىلاشقا بولىدۇ.كۈچەيتىلگەن مەھسۇلاتلاردا 3 '-dA چىقىپ كېتىش بار بولۇپ ، ئاسانلا T ۋېكتورغا كلونلىنىدۇ.2 × PCR Master Mix PCR تەرتىپىنى ئاددىيلاشتۇرىدۇ ۋە بۇلغىنىشنى ئازايتىدۇ.
ساقلاش شەرتلىرى
مەھسۇلاتلارنى -25 ℃ ~ -15 at 2 يىل ساقلاش كېرەك.
ئۆلچىمى
ۋاپادارلىق (vs.Taq) | 1 × |
Hot Start | No |
Overhang | 3 '-A |
Polymerase | تاق DNA پولىمېراسى |
ئىنكاس فورماتى | SuperMix ياكى Master Mix |
ئىنكاس سۈرئىتى | ئۆلچەملىك |
مەھسۇلات تىپى | PCR Master Mix (2x) |
كۆرسەتمە
1.ئىنكاس سىستېمىسى
زاپچاسلار | ھەجىم(μL) |
قېلىپ DNA | ماس كېلىدۇ |
Primer 1 (10 μ mmol / L) | 2 |
Primer 2 (10 μ mmol / L) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | to 50 |
2.كېڭەيتىش كېلىشىمنامىسى
دەۋرىيلىك باسقۇچلار | تېمپېراتۇرا (° C) | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
دەسلەپكى رەتلەش | 94 | 5 min | 1 |
Denaturation | 94 | 30 سېكۇنت | 35 |
Annealing | 50-60 | 30 سېكۇنت | |
كېڭەيتىش | 72 | 30-60 سېكۇنت / kb | |
ئاخىرقى كېڭەيتىش | 72 | 10 مىنۇت | 1 |
ئەسكەرتىش:
1) قېلىپنىڭ ئىشلىتىلىشى: 50-200ng گېن گۇرۇپپىسىدىكى DNA;0.1-10ng پىلاستىك DNA.
2) Mg2+قويۇقلۇقى: بۇ مەھسۇلاتنىڭ تەركىبىدە 3mM MgCl2 بار ، كۆپىنچە PCR ئىنكاسىغا ماس كېلىدۇ.
3) تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسى: پىرىمېرلارنىڭ نەزەرىيىۋى Tm قىممىتىنى كۆرۈڭ.ياندۇرۇش تېمپېراتۇرىسىنى دەسلەپكى كۆرسەتكۈچنىڭ نەزەرىيىۋى قىممىتىدىن 2-5 ℃ تۆۋەن قىلىپ تەڭشىگىلى بولىدۇ.
4) ئۇزارتىش ۋاقتى: مولېكۇلا پەرقلەندۈرۈش ئۈچۈن 30 سېكۇنت / kb تەۋسىيە قىلىنىدۇ.گېن كلونلاش ئۈچۈن 60 سېكۇنت / kb تەۋسىيە قىلىنىدۇ.
ئىزاھات
1.2 × PCR Master Mix بولغان PCR مەھسۇلاتلىرى پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسىغا ماس كەلمەيدۇ.
2.بىخەتەرلىكىڭىز ۋە ساغلاملىقىڭىز ئۈچۈن تەجرىبىخانا چاپان ۋە بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي كىيىڭ.
3.ئۇ پەقەت تەتقىقات ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ!