BspQI
BspQI E. coli دا قايتا-قايتا ئىپادىلىنىپ ، ئالاھىدە تور بېكەتلەرنى تونۇيالايدۇ ۋە ئاستىدا ئىشلەپچىقىرىلىدۇ
BspQI ، IIs چەكلىمىسى ئىچكى ئاجراتما چەكلىمىسى ئىچكى پەردىسى ، قايتا ھاسىل بولغان E. coli سىستىمىسىدىن ھاسىل قىلىنغان بولۇپ ، باكلۇس شارچىسىدىن كلونلانغان ۋە ئۆزگەرتىلگەن BspQI گېنىنى توشۇيدۇ.ئۇ ئالاھىدە تور بېكەتلەرنى تونۇيالايدۇ ، تونۇش تەرتىپى ۋە تازىلاش تور بېكەتلىرى تۆۋەندىكىچە:
5 '· · · · · GCTCTTC (N) · · · · · · · · · · 3 ·'
3 '· · · · CGAGAAG (NNNN) · · · · 5'
مەھسۇلات ئالاھىدىلىكى
1. يۇقىرى ھەرىكەت ، تېز ھەزىم قىلىش
2. تۆۋەن يۇلتۇز پائالىيىتى ، «باش تېرىسى» گە ئوخشاش توغرا كېسىشكە كاپالەتلىك قىلىش
3. BSA ۋە ھايۋانلارنىڭ كېلىپ چىقىشى ھەقسىز.
مېتىل سەزگۈرلىكى
Dam methylation:سەزگۈر ئەمەس
Dcm methylation:سەزگۈر ئەمەس
CpG Methylation:سەزگۈر ئەمەس
ساقلاش شارائىتى
بۇ مەھسۇلاتنى ئەۋەتىش كېرەك ≤ 0 ℃;-25 ~ - 15 ℃ ھالەتتە ساقلاڭ.
ساقلىغۇچ
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM dithiothreitol, 500 µg / ml Recombinant Albumin, 0. 1% Trition X- 100 and 50% glycerol (pH 7.0 @ 25 ° C).
بىرلىك ئېنىقلىمىسى
بىر بىرلىك 1 µg ئىچكى كونترول DNA نى 1 سائەت ئىچىدە 50 سېلسىيە گرادۇسلۇق ھەزىم قىلىشتا تەلەپ قىلىنغان ئېنزىمنىڭ مىقدارى 50 µL.
سۈپەت كونترول
ئاقسىلنىڭ ساپلىقى (SDS-PAGE):BspQI نىڭ ساپلىقى SDS-PAGE تەھلىلى تەرىپىدىن% 95 بېكىتىلدى.
RNase:10U BspQI نىڭ 1.6μg MS2 RNA بىلەن 4 سائەت 50 at 50 سائەتتە ئاگاروزا گېلى ئېلېكتروفورىسى تەرىپىدىن بېكىتىلگەندەك تۆۋەنلەش بولمايدۇ.
ئېنىق بولمىغان DNase پائالىيىتى:10U BspQI نىڭ 1μg λ DNA بىلەن 50 at 16 سائەت 16 سائەت ، 50 1 1 سائەتكە سېلىشتۇرغاندا ، ئاگاروزا گېلى ئېلېكتروفورىسى تەرىپىدىن بېكىتىلگەن ئارتۇقچە DNA ھاسىل قىلمايدۇ.
دەۋا ۋە رەتلەش:10U BspQI بىلەن 1 μg λDNA ھەزىم قىلىنغاندىن كېيىن ، DNA پارچىلىرىنى 16 سېلسىيە گرادۇسلۇق T4 DNA لىنزىسى بىلەن ئۇلىغىلى بولىدۇ.ھەمدە بۇ باغلانغان پارچىلارنى BspQI ئارقىلىق قايتا تەكرارلىغىلى بولىدۇ.
E. coli DNA: E. coli 16s rDNA بەلگىلىك TaqMan qPCR تەكشۈرۈشىدە E.coli گېن قالدۇقىنىڭ ≤ 0.1pg / ul ئىكەنلىكى كۆرسىتىلدى.
ساھىبجامال ئاقسىل قالدۇقى:≤ 50 ppm
باكتېرىيە Endotoxin: LAL- سىناق ، جۇڭگونىڭ Pharmacopoeia IV 2020 نەشرىگە ئاساسەن ، گېلى چەكلەش ئۇسۇلى ، ئومۇمىي قائىدە (1143).باكتېرىيەنىڭ ئىچكى ئاجراتما مىقدارى EU10 EU / mg بولۇشى كېرەك.
ئىنكاس سىستېمىسى ۋە شەرتلىرى
| زاپچاس | ھەجىم |
| BspQ I (10 U / μL) | 1 μL |
| DNA | 1 μg |
| 10 x BspQ I Buffer | 5 μL |
| dd H2O | 50 μL |
ئىنكاس شارائىتى ： 50 ℃, 1 ~ 16 h.
ئىسسىقلىق ئاكتىپلاش ： 80 ° C 20 مىنۇت.
تەۋسىيە قىلىنغان ئىنكاس سىستېمىسى ۋە شارائىتى بىر قەدەر ياخشى ئېنزىم ھەزىم قىلىش ئۈنۈمى بىلەن تەمىنلەيدۇ ، بۇ پەقەت پايدىلىنىش ئۈچۈنلا بولىدۇ ، تەپسىلاتلار ئۈچۈن تەجرىبە نەتىجىسىنى كۆرۈڭ.
مەھسۇلات ئىلتىماسى
ھەزىم قىلىشنى چەكلەش ھەزىم قىلىش ، تېز كلونلاش.
ئىزاھات
1. ئېنزىمنىڭ مىقدارى ≤ 1/10 رېئاكسىيە مىقدارى.
2. گلىتسېرىننىڭ قويۇقلۇقى% 5 تىن ئېشىپ كەتكەندە چولپانلار پائالىيىتى يۈز بېرىشى مۇمكىن.
3. تەۋسىيە قىلىنغان نىسبەتتىن تۆۋەن بولغاندا ، تازىلاش پائالىيىتى يۈز بېرىشى مۇمكىن.
