Bst 2.0 DNA پولىمېراسى (گلىتسېرىن ھەقسىز ، قويۇقلۇقى يۇقىرى)
Bst DNA پولىمېرازا V2 Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I دىن ھاسىل قىلىنغان ، ئۇنىڭ 5 ′ → 3 ′ DNA پولىمېرازا پائالىيىتى ۋە كۈچلۈك زەنجىرنى ئالماشتۇرۇش پائالىيىتى بار ، ئەمما 5 ′ → 3 ′ تاشقى كۆرۈنۈش پائالىيىتى يوق.Bst DNA Polymerase V2 بەلۋاغنىڭ يۆتكىلىشى ، ئىسسىقلىقنىڭ كۈچەيتىلىشى LAMP (Loop ۋاسىتىلىك ئىسسىقلىق بىلەن كۈچەيتىش) ۋە تېز تەرتىپكە ماس كېلىدۇ.بۇ Bst DNA پولىمېرازا V2 ئۆي تېمپېراتۇرىسىدىكى DNA پولىمېرازا پائالىيىتىنى تورمۇزلىيالايدۇ ، شۇڭا ئۇنى مەشغۇلات قىلغىلى ۋە ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا ئىنكاس سىستېمىسىنى شەكىللەندۈرگىلى بولىدۇ ، كونكرېت كېڭەيتىشنىڭ ئالدىنى ئالىدۇ ۋە ئىنكاسنىڭ ئۈنۈمىنى ئۆستۈرىدۇ ، بۇ نەشرى قىلالايدۇ be lyophilized.ئۇنىڭدىن باشقا ، ئۇ يۇقىرى تېمپېراتۇرىدا پائالىيىتىنى قويۇپ بېرەلەيدۇ ، شۇڭا ئايرىم قوزغىتىش باسقۇچىنىڭ ئېھتىياجىنى يوقاتقىلى بولىدۇ.
زاپچاسلار
| زاپچاس | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA پولىمېرازا V2 (گلىتسېرىنسىز) (32U / μL) | 0.05 mL | 0.25 mL | 2.5 mL |
| 10 × HC Bst V2 Buffer | 1.5 mL | 2 × 1.5 mL | 3 × 10 mL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 mL | 2 × 1.5 mL | 2 × 10 mL |
قوللىنىشچان پروگراممىلار
1.LAMP ئىسسىقلىق بىلەن كېڭەيتىش
2.DNA سىنىڭ يەككە كۆچۈش رېئاكسىيەسى
3.يۇقىرى GC گېن تەرتىپى
4.نانوگرامما سەۋىيىسىنىڭ DNA تەرتىپى.
ساقلاش ھالىتى
0 سېلسىيە گرادۇستىن تۆۋەن توشۇش -25 ° C ~ -15 ° C قا ساقلىنىدۇ.
بىرلىك ئېنىقلىمىسى
بىر ئورۇن 30 سېلسىيە گرادۇسلۇق 30 مىنۇتتا 25 nmol dNTP نى كىسلاتادا ئېرىمەس ماتېرىيالغا ئۆز ئىچىگە ئالغان ئېنزىمنىڭ مىقدارى دەپ ئېنىقلىما بېرىلگەن.
LAMP Reaction
| زاپچاسلار | 25 μLسىستېما |
| 10 × HC Bst V2 Buffer | 2.5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 μL |
| dNTPs (ھەر بىرى 10mM) | 3.5 μL |
| SYTO ™ 16 يېشىل (25 ×)a | 1.0 μL |
| Primer mixb | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (گلىتسېرىنسىز) (32 U / uL) | 0.25 μL |
| قېلىپ | × μL |
| ddH₂O | 25 μL |
ئىزاھات:
1) a.SYTOTM 16 يېشىل (25 ×): تەجرىبە ئېھتىياجىغا ئاساسەن ، باشقا بوياقلارنى ئالماشتۇرۇش ئورنىدا ئىشلىتىشكە بولىدۇ.
2) b.دەسلەپكى ئارىلاشتۇرۇش: 20 µM FIP ، 20 µM BIP ، 2.5 µM F3 ، 2.5 µM B3 ، 5 µM LF ، 5 µM LB ۋە باشقا توملارنى ئارىلاشتۇرۇش ئارقىلىق ئېرىشىلگەن.
ئىنكاس ۋە شەرت
1 × HC Bst V2 Buffer ، يوشۇرۇن تېمپېراتۇرا ° C 60 تىن ° C 65 ئارىلىقىدا.
Heat Inactivation
80 ° C ، 20 م.
