CHO HCP ELISA Kit
بۇ باسقۇچتا بىر باسقۇچلۇق ئىممۇنىتېت كۈچىگە ئىگە ELISA ئۇسۇلى قوللىنىلىدۇ.CHOK1 HCP نى ئۆز ئىچىگە ئالغان ئەۋرىشكەلەر ELISA تەخسىسىگە سىرلانغان HRP ماركىلىق ئۆچكە CHOK1 ئانتىتېلاسى ۋە CHOK1 گە قارشى ئانتىتېلا بىلەن بىرلا ۋاقىتتا ئىنكاس قايتۇرىدۇ ، ئاخىرىدا قاتتىق فازا ئانتىتېلاسى- HCP ماركىلىق ئانتىتېلانىڭ ساندۋىچ قۇرۇلمىسىنى شەكىللەندۈرىدۇ.ELISA تەخسىنى يۇيۇش ئارقىلىق باغلانمىغان ئانتىگېن ئانتىتېلاسىنى ئېلىۋەتكىلى بولىدۇ.يېتەرلىك ئىنكاس ئۈچۈن TMB تارماق ئېغىزى قۇدۇققا قوشۇلدى.توختىتىش ھەل قىلىش چارىسىنى قوشقاندىن كېيىن رەڭ تەرەققىياتى توختىتىلىدۇ ، 450/650nm دىكى رېئاكسىيە ھەل قىلىش چارىسىنىڭ OD ياكى سۈمۈرۈلۈش قىممىتى مىكروپ ئوقۇغۇچ بىلەن ئوقۇلىدۇ.OD قىممىتى ياكى سۈمۈرۈلۈش قىممىتى ھەل قىلىشتىكى HCP مەزمۇنىغا ماس كېلىدۇ.بۇنىڭدىن قارىغاندا ، ھەل قىلىشتىكى HCP قويۇقلۇقىنى ئۆلچەملىك ئەگرى سىزىق بويىچە ھېسابلىغىلى بولىدۇ.
ئىلتىماس
بۇ يۈرۈشلۈك ئەۋرىشكە تەركىبىدىكى CHOK1 غول ھۈجەيرە ئاقسىل قالدۇقىنىڭ مىقدارىنى مىقدارلاشتۇرۇپ بايقاشقا ئىشلىتىلىدۇ.
Component
| S / N. | زاپچاس | مەركەزلىشىش | ساقلاش شەرتلىرى |
| 1 | CHOK1 HCP ئۆلچىمى | 0.5mg / mL | ≤ - 20 ℃ |
| 2 | Anti-CHO HCP-HRP | 0.5mg / mL | ≤ - 20 ℃ ، نۇردىن ساقلاڭ |
| 3 | TMB | NA | 2-8 ℃ ، نۇردىن ساقلاڭ |
| 4 | 20 × PBST 0.05% | NA | 2-8 ℃ |
| 5 | ھەل قىلىش چارىسىنى توختىتىڭ | NA | RT |
| 6 | مىكرو تىپتىكى پېچەتلىگۈچىلەر | NA | RT |
| 7 | BSA | NA | 2-8 ℃ |
| 8 | يۇقىرى سۈمۈرۈلۈشتىن بۇرۇنقى تەخسە | NA | 2-8 ℃ |
ئۈسكۈنىلەر تەلەپ قىلىنىدۇ
| ئىستېمالچىلار / ئۈسكۈنىلەر | ياسىمىچىلىق | مۇندەرىجە |
| Microplate reader | مولېكۇلا ئۈسكۈنىلىرى | Spectra Max M5 ، M5e ياكى ئۇنىڭغا تەڭ |
| Thermomixer | Eppendorf | Eppendorf / 5355 ياكى ئۇنىڭغا باراۋەر |
| Vortex mixer | IKA | MS3 رەقەملىك ياكى شۇنىڭغا تەڭ |
ساقلاش ۋە مۇقىملىق
1.-25 ~ -15 ° C.
2.ساقلاش شارائىتى 1-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك.1-2 زاپچاسلىرى ≤ - 20 ° C ، 5-6 ساقلىنىدۇ RT ، 3 、4、7、8 2-8 at دە ساقلىنىدۇ;كۈچكە ئىگە مۇددىتى 12 ئاي.
مەھسۇلات پارامېتىرلىرى
1.سەزگۈرلۈكى: 1ng / mL
2.بايقاش دائىرىسى: 3- 100ng / mL
3.ئېنىقلىق: ئارىلاپ تەكشۈرۈش CV≤% 10 ، ئارىلىقتىكى CV≤ 15%
4.HCP نىڭ قاپلىنىش نىسبىتى:> 80%
5.ئالاھىدىلىكى: بۇ يۈرۈشلۈك زاپچاس ئومۇمىيۈزلۈك بولۇپ ، ئۇ تازىلاش جەريانىدىن مۇستەقىل ھالدا CHOK1 HCP بىلەن ئىنكاس قايتۇرىدۇ.
قايتا تەييارلىق قىلىش
1.PBST 0.05%
15 مىللىلېتىر 20 × PBST% 0.05 نى ئېلىڭ ، ddH دا سۇيۇلدۇرۇلدى2O, and made up to 300 ml.
2.1.0% BSA
بوتۇلكىدىن 1g BSA ئېلىپ ، 100 مىللىلېتىر PBST% 0.05 لىك سۇيۇلدۇرۇپ ، تولۇق ئېرىپ بولغۇچە ياخشى ئارىلاشتۇرۇڭ ، ° C 2-8 ° C قا ساقلاڭ.تەييارلانغان سۇيۇقلۇق بۇففېرنىڭ ۋاقتى 7 كۈن.ئېھتىياجغا قاراپ تەييارلىق قىلىش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.
3.بايقاش ھەل قىلىش چارىسى 2μg / mL
0.5 mg / mL دىن 48μL ئېلىپ ، CHO HCP-HRP نى ئېلىڭ ھەمدە% 1 BSA نىڭ 11،952μL دا سۇيۇلدۇرۇپ ، ئەڭ ئاخىرقى قويۇقلۇقى 2μg / mL بايقاش ئېرىتمىسىگە ئېرىشىڭ.
4.QC ۋە CHOK1 HCP ئۆلچىمىنىڭ تەييارلىنىشى
| Tube ياق. | ئەسلى | مەركەزلىشىش | ھەجىم | 1% BSA | ئومۇمىي ھەجىمى | Final |
| A | ئۆلچەملىك | 0.5mg / mL | 10 | 490 | 500 | 10،000 |
| B | A | 10،000 | 50 | 450 | 500 | 1000 |
| S1 | B | 1.000 | 50 | 450 | 500 | 100 |
| S2 | S1 | 100 | 300 | 100 | 400 | 75 |
| S3 | S2 | 75 | 200 | 175 | 375 | 40 |
| S4 | S3 | 40 | 150 | 350 | 500 | 12 |
| S5 | S4 | 12 | 200 | 200 | 400 | 6 |
| S6 | S5 | 6 | 200 | 200 | 400 | 3 |
| NC | NA | NA | NA | 200 | 200 | 0 |
| QC | S1 | 100 | 50 | 200 | 250 | 20 |
جەدۋەل: QC ۋە ئۆلچەملەرنى تەييارلاش
Assay Procedure
1.يۇقىرىدىكى «رېئاكتىپ تەييارلىق» تا كۆرسىتىلگەندەك رېئاكتورنى تەييارلاڭ.
2.ھەر بىر قۇدۇققا 50μL ئۆلچەم ، ئەۋرىشكە ۋە QC (3-جەدۋەلنى كۆرۈڭ) ئېلىڭ ، ئاندىن 100μL بايقاش ئېرىتمىسى (2μg / mL) قوشۇڭ.تاختاينى پېچەتلىگۈچ بىلەن يېپىپ ، ELISA تاختىسىنى تېرمومېتىرغا قويۇڭ.500rpm ، 25 ± 3 at دە 2 سائەت تۇرغۇزۇڭ.
3.مىكرو دولقۇننى چۆكمىگە ئايلاندۇرۇپ ، سىر ئېرىتمىسىنى تاشلاڭ.PBST 300μL PBST ھەر بىر قۇدۇققا% 0.05 لىك ELISA تەخسىنى يۇيۇپ ئېرىتمىنى تاشلىۋېتىپ ، يۇيۇشنى 3 قېتىم تەكرارلاڭ.تەخسىنى پاكىز قەغەز لۆڭگەگە توغرىلاپ قۇرۇتۇڭ.
4.ھەر بىر قۇدۇققا 100μLTMB تارماق ئېلېمېنتنى قوشۇڭ (1-جەدۋەلگە قاراڭ) ، ELISA تاختىسىنى پېچەتلەڭ ، قاراڭغۇدا 25 ± 3 at دە 15 مىنۇت تۇرغۇزۇڭ.
5.ھەر بىر قۇدۇققا 100μL توختايدىغان ھەل قىلىش چارىسى.
6.مىكرو دولقۇنلۇق ئوقۇرمەن بىلەن دولقۇن ئۇزۇنلۇقى 450 / 650nm.
7.SoftMax ياكى شۇنىڭغا ئوخشاش يۇمشاق دېتاللارنىڭ سانلىق مەلۇماتلىرىنى تەھلىل قىلىڭ.تۆت پارامېتىرلىق لوگىكىلىق چېكىنىش ئەندىزىسىنى ئىشلىتىپ ئۆلچەملىك ئەگرى سىزىقنى تۈزۈڭ.
ئۆلچەملىك ئەگرى مىسال
ئەسكەرتىش: ئەگەر ئەۋرىشكىدىكى HCP نىڭ قويۇقلۇقى ئۆلچەملىك ئەگرى سىزىقنىڭ يۇقىرى چېكىدىن ئېشىپ كەتسە ، سىناقتىن ئىلگىرى سۇيۇقلاندۇرۇش دورىسى بىلەن مۇۋاپىق سۇيۇلدۇرۇش كېرەك.
ئەسكەرتىش
توختىتىش ھەل قىلىش چارىسى 2M گۈڭگۈرت كىسلاتاسى ، ئېھتىيات بىلەن بىر تەرەپ قىلىپ ، چاچراپ كېتىشتىن ساقلىنىڭ!
