2 × PCR Master Mix (رەڭسىز)
PCR Master Mix بىر خىل ئادەتتىكى PCR ئالدىن ھەل قىلىش چارىسى بولۇپ ، ئىشلىتىشكە تەييارلانغان Taq DNA Polymerase ، DNTP ئارىلاش MgCl2 ۋە ئەلالاشتۇرۇلغان بۇففېر.ئىنكاس جەريانىدا كۈچەيتكۈچ ئۈچۈن پەقەت دەسلەپكى ۋە قېلىپلا قوشقىلى بولىدۇ ، بۇ سىناقنىڭ مەشغۇلات باسقۇچلىرىنى زور دەرىجىدە ئاددىيلاشتۇرىدۇ.بۇ مەھسۇلاتتا ئېسىل تۇراقلاشتۇرغۇچ بار بولۇپ ، 4 at دە 3 ئاي ساقلىغىلى بولىدۇ.PCR مەھسۇلاتىنىڭ 3′-dA پروگىراممىسى بار بولۇپ ، ئاسانلا T ۋېكتورىغا كلونلىنىدۇ.
ساقلاش شەرتلىرى
بۇ مەھسۇلاتنى -25 ℃ ~ -15 at ئىككى يىل ساقلاش كېرەك.
ئۆلچىمى
ۋاپادارلىق (vs.Taq) | 1 × |
Hot Start | No |
Overhang | 3′-A |
Polymerase | تاق DNA پولىمېراسى |
ئىنكاس فورماتى | SuperMix ياكى Master Mix |
ئىنكاس سۈرئىتى | ئۆلچەملىك |
مەھسۇلات تىپى | PCR Master Mix (2 ×) |
كۆرسەتمە
1.ئىنكاس سىستېمىسى
زاپچاسلار | چوڭلۇقى (μL) |
قېلىپ DNA | ماس كېلىدۇ |
Primer 1 (10 μ mmol / L) | 2 |
Primer 2 (10 μ mmol / L) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | To 50 |
2.كېڭەيتىش كېلىشىمنامىسى
دەۋرىيلىك باسقۇچلار | تېمپېراتۇرا (° C) | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
ئالدىن كېلىشىش | 94 ℃ | 5 مىنۇت | 1 |
Denaturation | 94 ℃ | 30 سېكۇنت | 35 |
Annealing | 50-60 ℃ | 30 سېكۇنت | |
كېڭەيتىش | 72 ℃ | 30-60sec / kb | |
ئاخىرقى كېڭەيتىش | 72 ℃ | 10 مىنۇت | 1 |
ئىزاھات:
1) قېلىپنىڭ ئىشلىتىلىشى: گېن گۇرۇپپىسىنىڭ 50-200 ng.0.1- 10 ng plasmid DNA.
2) Mg2+قويۇقلۇقى: بۇ مەھسۇلاتنىڭ كۆپىنچىسى PCR ئىنكاسىغا ماس كېلىدىغان 3 mM MgCl2 بار.
3) تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسى: Primers نىڭ نەزەرىيىۋى Tm قىممىتىنى كۆرۈڭ.ياندۇرۇش تېمپېراتۇرىسىنى دەسلەپكى كۆرسەتكۈچنىڭ نەزەرىيىۋى قىممىتىدىن 2-5 ℃ تۆۋەن قىلىپ تەڭشىگىلى بولىدۇ.
4) ئۇزارتىش ۋاقتى: مولېكۇلا پەرقلەندۈرۈش ئۈچۈن 30 سېكۇنت / kb تەۋسىيە قىلىنىدۇ.گېن كلونلاش ئۈچۈن ، 60sec / kb تەۋسىيە قىلىنىدۇ.
ئىزاھات
1.بىخەتەرلىكىڭىز ۋە ساغلاملىقىڭىز ئۈچۈن تەجرىبىخانا چاپان ۋە بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي كىيىڭ.
2.پەقەت تەتقىقات ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ!