كۆپ ئىقتىدارلىق بىر قەدەم RT-qPCR Premix
چۈشەندۈرۈش
مۈشۈك نومۇرى: HCR5141A
Multiplex بىر قەدەم RT-qPCR Premix بولسا RNA نى قېلىپ قىلىپ ئاساس قىلغان كۆپ ئىقتىدارلىق PCR Kit.تەجرىبىدە ، تەتۈر كۆچۈرۈش ۋە مىقدارلاشقان PCR ئوخشاش ئىنكاس نەيچىسىدە ئېلىپ بېرىلىپ ، تەجرىبە مەشغۇلاتى ئاددىيلاشتۇرۇلۇپ ، بۇلغىنىش خەۋىپى تۆۋەنلەيدۇ.بۇففېر ۋە ئېنزىم ئارىلاشمىسىنىڭ ئۆزگىچە لايىھىلىنىشىنى بىر باسقۇچلۇق لىمفىللاشتۇرۇلغان سىستېمىدا ئىشلىتىشكە بولىدۇ.بۇ يۈرۈشلۈك زاپچاسلار ئىسسىققا چىداملىق تەتۈر ترانسكرىپسىيەدىن پايدىلىنىپ ، مىقدارنى كېڭەيتىش ئۈچۈن hotstart Taq DNA Polymerase ئارقىلىق بىرىنچى تال CDNA نى ئۈنۈملۈك بىرىكتۈرۈش ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ.ئۇنىڭدا ئەلالاشتۇرۇلغان رېئاكسىيە بۇففېر ، فېرمېنت ئارىلاشمىسى قاتارلىقلار بار بولۇپ ، ئالاھىدە بولمىغان PCR كېڭەيتىشنى ئۈنۈملۈك چەكلەيدىغان ۋە كۆپ خىل qPCR ئىنكاسىنىڭ كۈچەيتىش ئۈنۈمىنى يۇقىرى كۆتۈرىدىغان ئامىللار قوشۇلۇپ ، پىرىمېرلارنىڭ كۈچەيتىش ئۈنۈمىگە كاپالەتلىك قىلىش بىلەن بىر ۋاقىتتا ، كۆپ خىل فلۇئورېسسېنسىيە مىقدارنى كۈچەيتكىلى بولىدۇ.
زاپچاسلار
| ئىسمى |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Enzyme Mix |
| 3. Lyo قوغدىغۇچى |
قاتناش قورالىion
جاۋاب: Lyo-buffer ۋە قوغدىغۇچى: -25 ~ -15 ℃ ، ساقلاش مۇددىتى 1 يىل.
B: Lyo- ئېنزىم ئارىلاشمىسى ، 2-8 ℃ ، ساقلاش مۇددىتى 6 ئاي.
مەشغۇلات كۆرسەتمىسى
1. ئىنكاس سىستېمىسى (25μL نى مىسالغا ئالايلى)
| زاپچاسلار | ھەجىمى (μL) | Final Concentration |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lyo-Enzyme Mix | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| Probe Mix (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| RNA Template | 5 | - |
| DEPC H2O | Up to 25 | - |
2. ئەلالاشتۇرۇلغان ۋېلىسىپىت كېلىشىمنامىسى
1) ئۆلچەملىك ۋېلىسىپىت كېلىشىمنامىسى
| ئىنكاس باسقۇچى | تېمپېراتۇرا | ۋاقىت | دەۋرىيلىك | |
| 1 | تەتۈر كۆچۈرۈلۈش | 50 ° C.a | 10min | 1 |
| 2 | دەسلەپكى رەتلەش | 95 ° C. | 5min | 1 |
| 3 | كۈچەيتمە ئىنكاس | 95 ° C. | 15sec | 45 دەۋرىيلىك |
| 60 ° C.b | 30secc |
2) تېز ۋېلىسىپىت مىنىش كېلىشىمنامىسى
|
| ئىنكاس باسقۇچى | تېمپېراتۇرا | ۋاقىت | دەۋرىيلىك |
| 1 | تەتۈر كۆچۈرۈلۈش | 50 ° C.a | 2min | 1 |
| 2 | دەسلەپكى رەتلەش | 95 ° C. | 2sec | 1 |
| 3 | كۈچەيتمە ئىنكاس | 95 ° C. | 1sec |
45 دەۋرىيلىك |
| 60 ° C.b | 13secc |
ئەسكەرتىش:
a) تەتۈر transcription: تېمپېراتۇرا 42 سېلسىيە گرادۇس ياكى 50 سېلسىيە گرادۇسنى 10-15 مىنۇتقىچە تاللىيالايدۇ.
b) كۈچەيتمە ئىنكاس: تېمپېراتۇرا لايىھەلەنگەن پىرىماتلارنىڭ Tm قىممىتىگە ئاساسەن تەڭشىلىدۇ.
c)Fluorescence سىگنال سېتىۋېلىش: تەجرىبە تەرتىپىنى تەلەپكە ئاساسەن بېكىتىڭinstrument manual.
تېخنىكىلىق ئۇچۇرلار / ئۆلچىمى
| Hot Start | ئىچىگە ئورنىتىلغان قىزىق باشلىنىش |
| بايقاش ئۇسۇلى | دەسلەپكى تەكشۈرۈش |
| PCR ئۇسۇلى | بىر قەدەم RT-qPCR |
| ئەۋرىشكە تىپى | RNA |
ئىزاھات
1. بۇ مەھسۇلات پەقەت تەتقىقات ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ.
2. سالامەتلىكىڭىز ۋە بىخەتەرلىكىڭىزگە كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن كېرەكلىك PPE ، تەجرىبىخانا چاپان ۋە پەلەي كىيىڭ.
