Rnase A.
Ribonuclease A (RNaseA) بولسا تاق يۆنىلىشلىك پولى پېپتىد بولۇپ ، تەركىبىدە 4 دانە دېسففىدلىق باغلىنىش بار ، مولېكۇلا ئېغىرلىقى تەخمىنەن 13.7 kDa.RNase A بولسا C ۋە U قالدۇقلىرىدىكى تاق يۆنىلىشلىك RNA نى ئالاھىدە تۆۋەنلىتىدىغان ئىچكى ئەزا.كونكېرت قىلىپ ئېيتقاندا ، يېرىلىش يادروسى 5′-رىبوزا ۋە فوسفات گۇرۇپپىسىنىڭ قوشنا پىرىمىمىن يادروسىنىڭ 3 ′ رىبوزىدا ھاسىل بولغان فوسفودىستېر باغلىنىشىنى تونۇپ يېتىدۇ ، شۇڭا 2 ، 3 ′ دەۋرىيلىك فوسفات ماس ھالدا 3 گە ھىدرولىزلىنىدۇ. Uc nucleoside فوسفات (مەسىلەن pG-pG-pC-pA-pG RNase A تەرىپىدىن pG-pG-pCp ۋە A-PG ھاسىل قىلىدۇ).RNase A تاق يۆنىلىشلىك RNA نى تازىلاشتىكى ئەڭ ئاكتىپ.تەۋسىيە قىلىنغان خىزمەتنىڭ قويۇقلۇقى 1-100μG / mL بولۇپ ، ھەر خىل ئىنكاس سىستېمىسىغا ماس كېلىدۇ.تۆۋەن تۇز قويۇقلۇقى (0-100 mM NaCl) RNA-DNA ئارىلاشتۇرۇش ئارقىلىق شەكىللەنگەن تاق لىنىيىلىك RNA ، قوش لىنىيىلىك RNA ۋە RNA زەنجىرىنى كېسىشكە ئىشلىتىلىدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، يۇقىرى تۇز قويۇقلۇقىدا (≥0.3 M) ، RNase A پەقەت تاق لىنىيىلىك RNA نىلا تازىلايدۇ.
RNase A كۆپىنچە پىلازما DNA ياكى گېن گۇرۇپپىسىنى تەييارلاش جەريانىدا RNA نى ئېلىۋېتىشتە ئىشلىتىلىدۇ. DNase تەييارلىق جەريانىدا ئاكتىپ ياكى ئاكتىپ بولمىسا ، ئىنكاسقا ئاسانلا تەسىر كۆرسىتىدۇ.سۇ مۇنچىسىدا قاينىتىشنىڭ ئەنئەنىۋى ئۇسۇلى DNase پائالىيىتىنى قوزغىتىشقا ئىشلىتىلىدۇ.بۇ مەھسۇلات DNase ۋە ئاقسىلنى ئۆز ئىچىگە ئالمايدۇ ، ئىشلىتىشتىن بۇرۇن ئىسسىقلىق بىر تەرەپ قىلىشنى تەلەپ قىلمايدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، بۇ مەھسۇلاتنى RNase قوغداش ئانالىزى ۋە RNA تەرتىپ ئانالىزى قاتارلىق مولېكۇلا بىئولوگىيە تەجرىبىسىمۇ ئىشلىتىشكە بولىدۇ.
ساقلاش شەرتلىرى
بۇ مەھسۇلاتنى -25 ～ -15 at دا ساقلىغىلى بولىدۇ ، كۈچكە ئىگە 2 يىل.
كۆرسەتمە
بۇ RNase A ساقلاش ھەل قىلىش چارىسىنى تەييارلاشتىكى كۆپ ئۇچرايدىغان ئۇسۇللارنىڭ بىرى.ئۇنىمۇ تەييارلىغىلى بولىدۇتەجرىبىخانا ياكى پايدىلىنىش ئەدەبىياتىدىكى ئەنئەنىۋى ئۇسۇللار بويىچە باشقا ئۇسۇللار10 mM Tris-HCl ، pH 7.5 ياكى Tris-NaCl ئېرىتمىسىدە بىۋاسىتە ئېرىپ كېتىدۇ)
1. 10 mM ناترىي ئاتسېتات (pH 5.2) نى ئىشلىتىپ ، RNase A ساقلاش ئېرىتمىسىنىڭ 10 mg / mL تەييارلاڭ
2. 15 at 15 مىنۇتتا قىزىتىش
3. ئۆينىڭ تېمپېراتۇرىسىغا سوۋۇتۇش ، 1 M Tris-HCl (pH 7.4) نىڭ 1/10 ھەجىمىنى قوشۇش ، pH نى 7.4 گە تەڭشەش (ئۈچۈن)مەسىلەن ، 500 مىللىگىرام 10g / ml RNase ساقلاش ئېرىتمىسى 1M Tris-HCL ، PH7.4 نى قوشۇڭ)
4. توڭلىتىلغان ساقلاش ئۈچۈن -20 at دە كىچىك ئورالغان بولۇپ ، 2 يىلغىچە مۇقىم تۇرالايدۇ.
[ئەسكەرتىش]: بىتەرەپ شارائىتتا RNaseA ئېرىتمىسىنى قاينىغاندا ، RNase ھۆل-يېغىن ھاسىل بولىدۇ.ئۇنى تۆۋەن pH دە قاينىتىڭ ، ئەگەر ھۆل-يېغىن بولسا ، ئۇنى كۆرگىلى بولىدۇ ، بۇ ئاقسىلنىڭ بۇلغىنىشىدىن كېلىپ چىقىشى مۇمكىن.ئەگەر قاينىغاندىن كېيىن چۆكمە بايقالسا ، يۇقىرى سۈرئەتلىك مەركەزدىن قاچۇرۇش (13000rpm) ئارقىلىق بۇلغانمىلارنى چىقىرىپ تاشلاپ ، ئاندىن توڭلاتقۇغا قاچىلاشقا بولىدۇ.
مەھسۇلات ئۇچۇرى
| مەنىداش سۆزلەر | Ribonuclease I;ئاشقازان ئاستى بېزى راكىRibonuclease 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;Endoribonulcease I. |
| CAS No. | 9001-99-4 |
| كۆرۈنۈش | ئاق لىمفىللانغان پاراشوك |
| مولېكۇلا ئېغىرلىقى | ~ 13.7kDa (ئامىنو كىسلاتا تەرتىپى) |
| Ph Value | 7.6 (پائالىيەت دائىرىسى 6-10) |
| ماس كېلىدىغان تېمپېراتۇرا | 60 ℃ (پائالىيەت دائىرىسى 15-70 ℃) |
| ئاكتىپ ۋاكالەتچى | Na2+.K.+ |
| Inhibitor | Rnase Inhibitor |
| ئاكتىپلاش ئۇسۇلى | ئىسسىنىش ئارقىلىق قوزغىتىشقا بولمايدۇ ، مەركەزدىن قېچىش تۈۋرۈكى ئىشلىتىش تەۋسىيە قىلىنىدۇ |
| Origin | Bovine |
| Solubility | سۇدا ئېرىيدۇ (10mg / ml) |
| قۇرغاقچىلىق | ≤5.0% |
| فېرمېنت پائالىيىتى | ≥60 Kunitz بىرلىكى / mg |
| Isoelectric point | 9.6 |
ئىزاھات
بىخەتەرلىكىڭىز ۋە ساغلاملىقىڭىز ئۈچۈن تەجرىبىخانا چاپان ۋە بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي كىيىڭ.
