5 × Neoscript تېز RT-qPCR Premix plus-UNG

مۈشۈك نومۇرى: HCB5142A

Neoscript تېز RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) بىر باسقۇچلۇق تەتۈر كۆچۈرۈلۈش ۋە مىقدارلاشقان PCR (qRT-PCR) غا ماس كېلىدىغان يۇقىرى تۇراقلىق بىر تۇرۇبا تەكشۈرۈشنى ئاساس قىلغان ئارىلاشما.ئۇ پىرىمېر ۋە تەكشۈرۈش ئەسۋابىنى ئالدىن ئارىلاشتۇرۇشنى قوللايدۇ ھەمدە تۆۋەن تېمپېراتۇرىدا ئۇزۇن ۋاقىت ساقلىغاندىن كېيىن مۇقىملىقنى ساقلايدۇ.سىناق قىلىنىدىغان ئەۋرىشكىنى ئىشلەتكەندە بىۋاسىتە قوشقىلى بولىدۇ ، قوشۇمچە تۇرۇبا ئېچىش / تۇرۇبا مەشغۇلاتى قىلمايدىكەن.بۇ مەھسۇلات زاپچاسلار بىلەن تەمىنلەيدۇ ، مەسىلەن قىزىق قوزغىلىدىغان DNA پولىمېراسى ، M-MLV ، ئىسسىقلىق بىلەن ئىشلەيدىغان سۈيدۈك ئاجرىتىش سىستېمىسى DNA گلىكوسىلازا (TS-UNG) ، RNase Inhibitor ، MgCl₂, dNTPs (dTTP نىڭ ئورنىغا dUTP بار) ۋە مۇقىملاشتۇرغۇچ.گېنى ئۆزگەرتىلگەن تېز كۈچەيتكۈچ تەتۈر كۆچۈرۈلگەن ۋە DNA پولىمېراسى بىلەن 20-40 مىنۇت ئىچىدە PCR كېڭەيتىشنى تاماملىغىلى بولىدۇ.بۇ رېئاكتور qPCR ئۈچۈن تورمۇزلىنىشقا قارشى كۈچەيتكۈچى فېرمېنت ۋە UNG ئېنزىمنىڭ ئارىلاشما فېرمېنتى بىلەن ئالاھىدە بۇففېر ئىشلىتىدۇ.شۇڭلاشقا ، ئۇ نىشانلىق گېننىڭ ياخشى كۈچەيتىلىشىگە ئېرىشىپ ، PCR قالدۇقلىرى ۋە ئايروسولنىڭ بۇلغىنىشىدىن كېلىپ چىققان يالغان كۈچەيتىشنىڭ ئالدىنى ئالالايدۇ.بۇ رېئاكتور قوللىنىشچان بىئولوگىيىلىك سىستېما ، Eppendorf ، Bio-Rad ۋە Roche قاتارلىق ئىشلەپچىقارغۇچىلارنىڭ كۆپىنچە فتور فېرمېنسىيىلىك مىقدار PCR ئەسۋابلىرىغا ماس كېلىدۇ.

زاپچاس

1.25 × Neoscript تېز RTase / UNG Mix

2.5 × Neoscript تېز RT Premix Buffer (dUTP)

ساقلاش شەرتلىرى

بارلىق زاپچاسلارنى -20 at ئۇزۇن مۇددەت ساقلاش ، 4 3 3 ئايغىچە ساقلاش كېرەك.ئىشلىتىشتىن بۇرۇن ئېرىتىش ۋە مەركەزدىن قاچۇرغاندىن كېيىن ئوبدان ئارىلاشتۇرۇڭ.دائىم توڭلاپ قېلىشتىن ساقلىنىڭ.

qRT-PCR رېئاكسىيە سىستېمىسى تەييارلىقى

1) a. پىرىمېرنىڭ ئاخىرقى قويۇقلۇقى ئادەتتە 0.2μM.تېخىمۇ ياخشى نەتىجىگە ئېرىشىش ئۈچۈن ، دەسلەپكى قويۇقلۇقى 0.2-1μM ئارىلىقىدا ئەلالاشتۇرۇلىدۇ.ئادەتتە ، تەكشۈرۈشنىڭ قويۇقلۇقى 0.1-0.3μM ئارىلىقىدا ئەلالاشتۇرۇلىدۇ.

2) b. تېز PCR تەرتىپىنى ئىشلەتكەندە ، پىرىمېر ۋە تەكشۈرۈش ئەسۋابىنىڭ قويۇقلۇقىنى ئاشۇرۇش تېخىمۇ ياخشى كۈچەيتىش نەتىجىسىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىشى مۇمكىن ، ھەمدە ئۇلارنىڭ نىسبىتىنى ماس ھالدا ئەلالاشتۇرۇش كېرەك.

3) ئوخشىمىغان تۈردىكى ئەۋرىشكىلەردە توسقۇنلۇق قىلغۇچى ۋە نىشان گېننىڭ كۆپەيتىلگەن نۇسخىسى بار.ئەۋرىشكە مىقدارىنى ئەمەلىي ئەھۋالغا قاراپ ئويلىشىش كېرەك.زۆرۈر تېپىلغاندا ئەۋرىشكىنى يادروسىز سۇ ياكى TE Buffer بىلەن سۇيۇلدۇرۇڭ.

ئىنكاس C.onditions

سۈپەت كونترول

1.ئىقتىدارنى بايقاش: qPCR نىڭ سەزگۈرلۈكى ، خاسلىقى ۋە تەكرارلىنىشى.

2.تاشقى يادرو پائالىيىتى يوق: تاشقى مەنبەلىك ئىچكى ئاجراتما ۋە بۇلغىنىش بولمايدۇ.

ئىزاھات

1.تېز سۈرئەتلىك DNA پولىمېراسىنىڭ كۈچەيتىلىش نىسبىتى 1kb / 10s دىن كەم بولمايدۇ.ئوخشىمىغان PCR ئەسۋابلىرىنىڭ ئىسسىنىش ۋە سوۋۇتۇش سۈرئىتى ، تېمپېراتۇرىنى كونترول قىلىش ھالىتى ۋە ئىسسىقلىق ئۆتكۈزۈشچانلىقى ئوخشىمايدۇ ، شۇڭا سىزنىڭ تېز سۈرئەتلىك PCR ئەسۋابىڭىز بىلەن بىرلەشتۈرۈپ دەسلەپكى / تەكشۈرۈش ئەسۋابىنىڭ قويۇقلۇقى ۋە ئىجرا ئۇسۇلىنى ئەلالاشتۇرۇش تولىمۇ مۇھىم.

2.بۇ مەھسۇلاتنىڭ قوللىنىشچانلىقى كەڭ بولۇپ ، يۇقىرى سەزگۈرلۈك مولېكۇلا دىئاگنوزىغا ماس كېلىدۇ.تۆۋەن تېمپېراتۇرا تۆۋەن بولغان پىرىمېرلارغا ياكى 200 bp دىن ئېشىپ كەتكەن ئۇزۇن پارچىلارنى كېڭەيتىش ئۈچۈن ئۈچ باسقۇچلۇق PCR ئۇسۇلى تەۋسىيە قىلىنىدۇ.

3.ئوخشىمىغان ئامپلوننىڭ DUTP نىڭ ئىشلىتىش ئۈنۈمى ۋە UNG غا بولغان سەزگۈرلۈكى ئوخشاش بولمىغاچقا ، UNG سىستېمىسىنى ئىشلەتكەندە بايقاش سەزگۈرلۈكى تۆۋەنلىسە رېئاكتورنى ئەلالاشتۇرۇش كېرەك.ئەگەر ئېھتىياجلىق بولسا تېخنىكىلىق ياردەم ئۈچۈن بىز بىلەن ئالاقىلىشىڭ.

4.توشۇغۇچى PCR مەھسۇلاتلىرىنىڭ كۈچىيىشىدىن ساقلىنىش ئۈچۈن ، كېڭەيتىش ئۈچۈن مەخسۇس تەجرىبە رايونى ۋە تۇرۇبا يولى تەلەپ قىلىنىدۇ.پەلەي بىلەن مەشغۇلات قىلىڭ ھەمدە دائىم ئالماشتۇرۇڭ ، كۈچەيتىلگەندىن كېيىن PCR تۇرۇبىسىنى ئاچماڭ.