DNase I (Rnase Free) (5u / ul)
مۈشۈك نومۇرى: HC4007A
DNase I (Deoxyribonuclease I) بولسا بىر ياكى قوش يۆنىلىشلىك DNA نى ھەزىم قىلالايدىغان ئىچكى ئاجراتما ئوكسىد.ئۇ فوسفودىستېرلىق باغلىنىشنى تونۇپ ۋە يېپىپ ، 5-تېرمىنالدىكى فوسفات گۇرۇپپىسى بىلەن يەككە ياكى قوش يۆنىلىشلىك ئولىگودوكسىنوكلېئوتىد ۋە 3-تېرمىنالدىكى گىدروكسىل ھاسىل قىلىدۇ.DNase I نىڭ پائالىيىتى Ca غا باغلىق2+ھەمدە Mn غا ئوخشاش ئوخشىمىغان مېتال ئىئونلىرى ئارقىلىق قوزغىتىشقا بولىدۇ2+and Zn2+.5 mM Ca.2+ئېنزىمنى گىدرولىزدىن ساقلايدۇ.Mg نىڭ ئالدىدا2+بۇ ئېنزىم خالىغان بىر DNA نى خالىغانچە تونۇيالايدۇ.Mn نىڭ ئالدىدا2+ئوخشاش بىر ئورۇندا دېگۈدەك DNA نىڭ قوش لىنىيىسىنى بىرلا ۋاقىتتا تونۇغىلى ۋە يېپىشقا بولىدۇ ، تەكشى ئۇچىدىكى DNA پارچىلىرى ياكى 1-2 يادروسى چىقىپ تۇرىدىغان يېپىشقاق DNA پارچىلىرى ھاسىل بولىدۇ.
زاپچاسلار
ئىسمى | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
DNase I, RNase-free | 20μL | 200μL | 1mL | 10 mL |
10 × DNase I Buffer | 1mL | 1mL | 5 × 1mL | 5 × 10 mL |
ساقلاش شارائىتى
ساقلاش ئۈچۈن -25 ℃ ~ -15;;مۇز خالتىسى ئاستىدا توشۇش.
كۆرسەتمە
1. تۆۋەندە كۆرسىتىلگەن نىسبەت بويىچە RNase ھەقسىز تۇرۇبىدىكى ئىنكاس ھەل قىلىش چارىسىنى تەييارلاڭ:
زاپچاس | ھەجىم |
RNA | X µg |
10 × DNase I Buffer | 1μL |
DNase I, RNase-free (5U / μL) | 1 U µg RNA① |
ddH2O | 10μL غىچە |
ئەسكەرتىش: DN RNA نىڭ مىقدارىغا ئاساسەن قوشۇشقا تېگىشلىك DNase I نىڭ ئاۋازىنى ھېسابلاڭ.
2. 37 15 15 مىنۇت;
3. ئەڭ ئاخىرقى قويۇقلۇقى 2.5mM ~ 5mM غا 0.5M EDTA قوشۇڭ ، 65 at at 10 مىنۇت قىزىتىپ ، ئىنكاسنى توختىتىڭ.بۇ ئەۋرىشكىنى تەتۈر كۆچۈرۈش قاتارلىق كېيىنكى ئىنكاسلارغا بىۋاسىتە ئىشلىتىشكە بولىدۇتەجرىبە.
بىرلىك ئېنىقلىمىسى
بىر بىرلىك pBR322 نىڭ 1µg نى پۈتۈنلەي تۆۋەنلىتىدىغان ئېنزىمنىڭ مىقدارى دەپ ئېنىقلىما بېرىلگەن37 مىنۇتتا 10 مىنۇتتا DNA.
سۈپەت كونترول
RNase:5U DNase I نىڭ 1.6µg MS2 RNA بىلەن 4 سائەت 37 at دە 4 سائەت تۆۋەنلەيدۇ.ئاگاروزا گېلى ئېلېكتروفورىسى تەرىپىدىن بەلگىلىنىدۇ.
ئىزاھات
1. ئۆزىڭىز 0.5MEDTA تەييارلاڭ.
2. RNA نىڭ ھەر µg 1U DNase I نى ئىشلىتىڭ.قانداقلا بولمىسۇن ، RNA 1µg دىن تۆۋەن بولسا ، 1U DNase I نى ئىشلىتىڭ.
3. مەشغۇلات جەريانىدا ئېنزىمنى مۇزغا قويۇڭ.