بىر قەدەم تېز RT-qPCR Probe Premix-UNG
مۈشۈك نومۇرى: HCR5143A
بىر قەدەم RT-qPCR تەكشۈرۈش ئەسۋابى (FOR FAST) بولسا تەكشۈرۈشنى ئاساس قىلغان RT-qPCR تېز بايقاش زاپچىسى بولۇپ ، RNA نى قېلىپ قىلىپ (RNA ۋىرۇسىغا ئوخشاش) تاق ئەۋرىشىم ياكى كۆپ ئىقتىدارلىق مىقدار PCR ماس كېلىدۇ.بۇ مەھسۇلاتقا يېڭى بىر ئەۋلاد ئانتىتېلا ئۆزگەرتىلگەن Taq DNA پولىمېراسى ۋە بىر باسقۇچلۇق مەخسۇس تەتۈر كۆچۈرۈلگەن نۇسخىسى ئىشلىتىلگەن بولۇپ ، تېز سۈرئەتتە كۈچەيتىش ئۈچۈن ئەلالاشتۇرۇلغان بۇففېر ئىشلىتىلگەن بولۇپ ، كۈچەيتىش سۈرئىتى تېخىمۇ تېز ، كۈچەيتىش ئۈنۈمى ۋە ئېنىقلىقى يۇقىرى.ئۇ قىسقا ۋاقىت ئىچىدە تۆۋەن ۋە يۇقىرى قويۇقلۇق ئەۋرىشكىسىدىكى يەككە ئەۋرىشىملىك ۋە كۆپ ئىقتىدارلىق تەڭپۇڭلۇق كۈچەيتىشنى قوللايدۇ.
زاپچاسلار
1. 5 × RT-qPCR بۇففېر (U +)
2. ئېنزىم ئارىلاشمىسى (U +)
ئىزاھات:
a.5 × RT-qPCR بۇففېر (U +) dNTP ۋە Mg نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ2+;
b.ئېنزىم ئارىلاشمىسى (U +) تەتۈر كۆچۈرۈلۈش ، Hot Start Taq DNA پولىمېراسى ، RNase چەكلىگۈچ ۋە UDG نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.
c.RNase-free كۆرسەتمىلىرى ، EP تۇرۇبىسى قاتارلىقلارنى ئىشلىتىڭ.
ئىشلىتىشتىن بۇرۇن ، 5 × RT-qPCR بۇففېر (U +) نى تولۇق ئارىلاشتۇرۇڭ.ئېرىگەندىن كېيىن ھۆل-يېغىن بولسا ، بۇففېرنىڭ ئۆينىڭ تېمپېراتۇرىسىغا قايتىپ كېلىشىنى ساقلاڭ ، ئارىلاشتۇرۇڭ ۋە ئېرىتىڭ ، ئاندىن نورمال ئىشلىتىڭ.
ساقلاش شەرتلىرى
بۇ مەھسۇلات قۇرۇق مۇز بىلەن توشۇلغان بولۇپ ، -25 ~ -15 at دە 1 يىل ساقلىغىلى بولىدۇ.
كۆرسەتمە
1. ئىنكاس سىستېما
زاپچاسلار | ھەجىمى (20 μL) reaction) |
2 × RT-qPCR بۇففېر | 4μL |
ئېنزىم ئارىلاشمىسى (U +) | 0.8μL |
Primer Forward | 0.1 ~ 1.0μM |
Primer Reverse | 0.1 ~ 1.0μM |
TaqMan Probe | 0.05 ~ 0.25μM |
قېلىپ | X μL |
RNase-Free Water | to 25μL |
ئەسكەرتىش: ئىنكاس مىقدارى 10-50μL.
ۋېلىسىپىت مىنىش كېلىشىمنامىسى (S.tandard)
دەۋرىيلىك step | Temp. | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
تەتۈر كۆچۈرۈلۈش | 55 ℃ | 10 مىنۇت | 1 |
Initial Denaturation | 95 ℃ | 30 سېكۇنت | 1 |
Denaturation | 95 ℃ | 10 سېكۇنت | 45 |
Annealing / Extension | 60 ℃ | 30 سېكۇنت |
ۋېلىسىپىت مىنىش كېلىشىمنامىسى (تېز) دەۋرىيلىك step |
Temp. |
ۋاقىت |
ۋېلىسىپىت |
تەتۈر كۆچۈرۈلۈش | 55 ℃ | 5 min | 1 |
Initial Denaturation | 95 ℃ | 5 s | 1 |
Denaturation | 95 ℃ | 3 s | 43 |
Annealing / Extension | 60 ℃ | 10 s |
ئىزاھات:
a.تەتۈر كۆچۈرۈلۈش تېمپېراتۇرىسى 50 60 60 between ئارىلىقىدا بولۇپ ، تېمپېراتۇرىنىڭ ئۆرلىشى مۇرەككەپ قۇرۇلمىلار ۋە يۇقىرى CG مەزمۇن قېلىپىنى كېڭەيتىشكە ياردەم بېرىدۇ.
b.ئەڭ ياخشى تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسىنى دەسلەپكى كۆرسەتكۈچنىڭ Tm قىممىتىگە ئاساسەن تەڭشەش ، ھەمدە ھەقىقىي ۋاقىت PCR ئەسۋابىغا ئاساسەن فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالى توپلاشنىڭ ئەڭ قىسقا ۋاقتىنى تاللاش كېرەك.
ئىزاھات
ساغلاملىقىڭىز ۋە بىخەتەرلىكىڭىزگە كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن كېرەكلىك PPE ، تەجرىبىخانا چاپان ۋە پەلەي كىيىڭ!