2 × HiF Taq ۋە Master Mix
مۈشۈك نومۇرى: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (بوياق بىلەن) ئىشلىتىشكە تەييارلانغان 2 × ئالدىن تەييارلانغان ھەل قىلىش چارىسى بولۇپ ، Plus HIF DNA پولىمېراسى ، DNTP ۋە ئەلالاشتۇرۇلغان بۇففېر بار.ئۆي تېمپېراتۇرىسىدىكى ئىككى خىل يەككە ئانتىتېلا پولىمېرازا پائالىيىتىنى تورمۇزلايدۇ ۋە 3 ′ → 5 ′ ئوكسىدلىنىش پائالىيىتى ئاساسلىق ئارىلاشتۇرۇشقا قوشۇلۇپ ، ئاسان ۋە يۇقىرى ئېنىق بولغان Hot Start PCR ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ.كېڭەيتىش ئامىلى ئاساسلىق ئارىلاشتۇرۇشقا قوشۇلۇپ ، فېرمېنتنىڭ ئۇزۇن پارچىسىنى كۈچەيتىش ئىقتىدارىغا ئىگە قىلىدۇ ، كۈچەيتكۈچنىڭ ئۇزۇنلۇقى 13 كىلوگرامغا يېتىدۇ ، فېرمېنتنىڭ 5 ′ → 3 ′ DNA پولىمېرازا پائالىيىتى ۋە 3 ′ → 5 ′ بولىدۇ. exonuclease پائالىيىتى ، ئۇنىڭ سادىقلىقى تاق DNA پولىمېراسىنىڭ 83 ھەسسىسىگە توغرا كېلىدۇ ، بۇ ئادەتتىكى DNA پولىمېراسىنىڭ 9 ھەسسىسىگە تەڭ.ئۇ مۇرەككەپ قېلىپلارنى كېڭەيتىشكە ماس كېلىدۇ ، كۈچەيتمە مەھسۇلات ئۇششاق ئۇچى.
2 × HIF Taq plus Master Mix (بوياق بىلەن) تېز ھەم ئاسان ، سەزگۈرلۈك ، كۈچلۈك ئالاھىدىلىك ، ياخشى مۇقىملىق قاتارلىق ئەۋزەللىككە ئىگە ، ئىنكاس سىستېمىسى پەقەت دەسلەپكى ۋە قېلىپلارنىلا قوشۇشى كېرەك ، ھەمدە ئىككىنى كۈچەيتكىلى بولىدۇ. قەدەم باسقۇچلىرى ، تەجرىبە باسقۇچلىرىنى ئاددىيلاشتۇرۇش ۋە ۋاقىت تېجەش.بۇ مەھسۇلاتتا ئېلېكتروفورېز كۆرسەتكۈچ بوياقلىرى بار ، PCR مەھسۇلاتلىرىنى بىۋاسىتە ئېلېكترو فورېزغا ئىشلىتىشكە بولىدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، بۇ مەھسۇلاتتا يەنە ئالاھىدە قوغداش دورىسى بار ، بۇنداق بولغاندا ئۇستا ئارىلاشما قايتا-قايتا مۇزلىغاندىن كېيىن مۇقىم پائالىيەتنى ساقلاپ قالالايدۇ.
ساقلاش شەرتلىرى
مەھسۇلاتلارنى -25 ~ -15 at دە 1 يىل ساقلاش كېرەك.
ئۆلچىمى
مەھسۇلات ئۆلچىمى | Master Mix |
مەركەزلىشىش | 2 × |
Hot Start | ئىچىگە قاچىلانغان Hot Start |
Overhang | Blunt |
ئىنكاس سۈرئىتى | Rapid |
چوڭلۇقى (ئاخىرقى مەھسۇلات) | 13kb غىچە |
توشۇش شەرتى | قۇرۇق مۇز |
مەھسۇلات تىپى | يۇقىرى ساداقەتمەنلىك PCR ئالدىن تاللاشلىرى |
كۆرسەتمە
1.PCR ئىنكاس سىستېمىسى
زاپچاسلار | ھەجىمى (μL) |
DNA قېلىپى | ماس كېلىدۇ |
ئالدى پىرىسلاش (10 μ mmol / L) | 2.5 |
تەتۈر پىرىمېر (10 μ mmol / L) | 2.5 |
2 × HIF Taq plus Master Mix | 25 |
ddH2O | to 50 |
2.ئوخشىمىغان قېلىپلارنى ئىشلىتىشنى تەۋسىيە قىلىمىز
قېلىپنىڭ تىپى | پارچىلارنى 1kb دىن 10 kb غىچە كېڭەيتىڭ |
گېن DNA | 50ng-200 ng |
پلازما ياكى ۋىرۇسلۇق DNA | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (ئاخىرقى PCR ئىنكاس مىقدارىنىڭ% 10 دىن ئېشىپ كەتمەڭ) |
3.كېڭەيتىش كېلىشىمنامىسى
1) ئىككى باسقۇچلۇق كېلىشىم (مۇرەككەپ قېلىپ)
دەۋرىيلىك قەدەم | Temp. | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
دەسلەپكى رەتلەش | 98 ℃ | 3 min | 1 |
Denaturation | 98 ℃ | 10sec | 30-35 |
كېڭەيتىش | 68 ℃ | 30 سېكۇنت / kb | |
ئاخىرقى كېڭەيتىش | 72 ℃ | 5 min | 1 |
2) ئۈچ باسقۇچلۇق كېلىشىم (دائىملىق كېلىشىم)
دەۋرىيلىك قەدەم | Temp. | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
دەسلەپكى رەتلەش | 98 ℃ | 3 min | 1 |
Denaturation | 98 ℃ | 10sec | 30-35 |
Annealing | 60 ℃ | 20 سېكۇنت | |
كېڭەيتىش | 72 ℃ | 30 سېكۇنت / kb | |
ئاخىرقى كېڭەيتىش | 72 ℃ | 5 min | 1 |
3) Annealing Gradient Protocol (مۇرەككەپ قېلىپ)
دەۋرىيلىك قەدەم | تېمپېراتۇرا | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
دەسلەپكى رەتلەش | 98 ℃ | 3 min | 1 |
Denaturation | 98 ℃ | 10 سېكۇنت | 15 (1 per ھەر بىر دەۋرىيلىكنى ئازايتىش) |
Gradient annealing | 70-55 ℃ | 20 سېكۇنت | |
كېڭەيتىش | 72 ℃ | 30 سېكۇنت / kb | |
Denaturation | 98 ℃ | 10 سېكۇنت |
20 |
Annealing | 55 ℃ | 20 سېكۇنت | |
كېڭەيتىش | 72 ℃ | 30 سېكۇنت / kb | |
ئاخىرقى كېڭەيتىش | 72 ℃ | 5 min | 1 |
ئوخشىمىغان كۈچەيتمە كېلىشىمنامىدىكى ئىقتىدارلار
Protocol | ئىككى باسقۇچ | ئۈچ باسقۇچ | Gradient annealing |
Spec. | تېز | ئوتتۇراھال | ئاستا |
كونكرېتلىقى | ئېگىز | ئوتتۇراھال | ئېگىز |
PCR ھوسۇلى | ئوتتۇراھال | ئېگىز | ئوتتۇراھال |
بايقاش نىسبىتى | ئېگىز | ئوتتۇراھال | ئېگىز |
ئىزاھات
ساغلاملىقىڭىز ۋە بىخەتەرلىكىڭىزگە كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن كېرەكلىك PPE ، تەجرىبىخانا چاپان ۋە پەلەي كىيىڭ!