2 × Rapid Taq Super Mix
مۈشۈك نومۇرى: HCR2016A
2 × Rapid Taq Super Mix ئۆزگەرتىلگەن Taq DNA Polymerase نى ئاساس قىلغان بولۇپ ، كۈچلۈك كېڭەيتىش ئامىلى ، كۈچەيتكۈچنى ئاشۇرۇش ئامىلى ۋە ئەلالاشتۇرۇلغان بۇففېر سىستېمىسى قوشۇلغان ، دەرىجىدىن تاشقىرى يۇقىرى كۈچەيتىش ئۈنۈمى بار.3 كىلوگرام ئىچىدىكى گېنغا ئوخشاش مۇرەككەپ قېلىپلارنىڭ كېڭەيتىش سۈرئىتى 1-3 سېكۇنت / كىلوگرامغا يېتىدۇ ، 5 كىلوگرام ئىچىدىكى پلازما قاتارلىق ئاددىي قېلىپلارنىڭ تېزلىكى 1 سېكۇنت.بۇ مەھسۇلات PCR نىڭ ئىنكاس ۋاقتىنى زور دەرىجىدە تېجەپ قالالايدۇ.شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا ، ئارىلاشتۇرۇشتا dNTP ۋە Mg2 + بار بولۇپ ، پەقەت دەسلەپكى ۋە قېلىپلارنى قوشقاندىلا كۈچەيتكىلى بولىدۇ ، بۇمۇ سىناقنىڭ مەشغۇلات باسقۇچلىرىنى زور دەرىجىدە ئاددىيلاشتۇرىدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، ئارىلاشما ئېلېكتروفورتىك كۆرسەتكۈچ بوياقنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بولۇپ ، رېئاكسىيەدىن كېيىن بىۋاسىتە ئېلېكترو فوروز بولىدۇ.بۇ مەھسۇلاتتىكى قوغدىغۇچى ۋاكالەتچى قايتا-قايتا توڭلىتىش ۋە ئېرىتىشتىن كېيىن ئارىلاشما ھەرىكەتنى مۇقىملاشتۇرىدۇ.PCR مەھسۇلاتىنىڭ 3-ئاخىرىدىكى بەلۋاغ A نى ئاسانلا ۋېكتورغا ئايلاندۇرغىلى بولىدۇ.
زاپچاسلار
2 × Rapid Taq Super Mix
ساقلاش شەرتلىرى
PCR Master Mix مەھسۇلاتلىرىنى -25 ~ -15 at دە 2 يىل ساقلاش كېرەك.
ئۆلچىمى
مەھسۇلات ئۆلچىمى | Rapid Taq Super Mix |
مەركەزلىشىش | 2 × |
Hot Start | ئىچىگە قاچىلانغان Hot Start |
Overhang | 3′-A |
ئىنكاس سۈرئىتى | Rapid |
چوڭلۇقى (ئاخىرقى مەھسۇلات) | ئەڭ يۇقىرى بولغاندا 15 kb |
توشۇش شەرتى | قۇرۇق مۇز |
كۆرسەتمە
1. رېئاكسىيە سىستېمىسى (50 μL)
زاپچاسلار | چوڭلۇقى (μL) |
ئەندىزە DNA * | ماس كېلىدۇ |
ئالدى پىرىسلاش (10 μ mmol / L) | 2.5 |
تەتۈر پىرىس (10 μ mmol / L)) | 2.5 |
2 × Rapid Taq Super Mix | 25 |
ddH2O | to 50 |
2.كېڭەيتىش كېلىشىمنامىسى
دەۋرىيلىك باسقۇچلار | تېمپېراتۇرا (° C) | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
Predenaturation | 94 | 3 min | 1 |
Denaturation | 94 | 10 سېكۇنت |
28-35 |
Annealing | 60 | 20 سېكۇنت | |
كېڭەيتىش | 72 | 1-10 سېكۇنت / kb |
ئوخشىمىغان قېلىپلارنى ئىشلىتىش تەۋسىيە قىلىنىدۇ:
قېلىپنىڭ تىپى | بۆلەك ئىشلىتىش دائىرىسى (50 μL رېئاكسىيە سىستېمىسى) |
گېن DNA ياكى E. coli سۇيۇقلۇقى | 10–1000 ng |
پلازما ياكى ۋىرۇسلۇق DNA | 0.5-50 ng |
cDNA | 1-5 µL (PCR ئىنكاسىنىڭ ئومۇمىي ھەجىمىنىڭ 1/10 دىن ئېشىپ كەتمەيدۇ) |
ئوخشىمىغان قېلىپلارنى ئىشلىتىشنى تەۋسىيە قىلىمىز |
ئىزاھات:
1.قايتا ئىشلىتىش: ئىشلىتىشتىن بۇرۇن تولۇق ئېرىتىش ۋە ئارىلاشتۇرۇش.
2. تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسى: تۇتاشتۇرۇش تېمپېراتۇرىسى ئۇنىۋېرسال Tm قىممىتى ، شۇنداقلا دەسلەپكى Tm قىممىتىدىن 1-2 ℃ تۆۋەن تەڭشىگىلى بولىدۇ.
3. كېڭەيتىش سۈرئىتى: گېن ۋە E. coli قاتارلىق مۇرەككەپ قېلىپلارغا 1 سېكۇنت ئىچىدە 1 سېكۇنت بەلگىلەڭ.1-3 kb گېن ۋە E. coli قاتارلىق مۇرەككەپ قېلىپلارغا 3 سېكۇنت / kb بەلگىلەڭ.3 kb دىن يۇقىرى گېن ۋە E. coli دىن مۇرەككەپ قېلىپلارغا 10 سېكۇنت / kb بەلگىلەڭ.سىز 5 kb دىن تۆۋەن پلازما ، 5 سېكۇنت / kb دىن ئاشىدىغان ئاددىي قېلىپنىڭ قىممىتىنى 1 سېكۇنت / kb قىلىپ تەڭشىيەلەيسىز ، ئاددىي قېلىپ ئۈچۈن 5 دىن 10 كىلوگرامغىچە بولغان پلازما ، 10 سېكۇنت / kb. مەسىلەن 10 كىلوگرامدىن چوڭ پلازما دېگەندەك.
ئىزاھات
1. بىخەتەرلىكىڭىز ۋە ساغلاملىقىڭىز ئۈچۈن تەجرىبىخانا چاپان ۋە بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي كىيىڭ.
2. بۇ مەھسۇلات پەقەت تەتقىقات ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ!