كۆپ ئىقتىدارلىق بىر قەدەم RT-qPCR Premix-UNG
مۈشۈك نومۇرى: HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) بولسا RNA نى ئاساس قىلغان كۆپ ئىقتىدارلىق PCR يۈرۈشلۈك زاپچاس.تەجرىبە جەريانىدا ، تەتۈر كۆچۈرۈلۈش ۋە مىقدارلاشقان PCR ئوخشاش نەيچىدە ئېلىپ بېرىلىپ ، تەجرىبە مەشغۇلاتىنى ئاددىيلاشتۇرۇپ ، بۇلغىنىش خەۋپىنى تۆۋەنلەتتى.بۇ يۈرۈشلۈك زاپچاستا ، تۇنجى تال CDNA ئىسسىقلىققا چىداملىق تەتۈر كۆچۈرۈلۈش ئارقىلىق ئۈنۈملۈك بىرىكتۈرۈلۈپ ، HotStart Tag DNA Polymerase تەرىپىدىن مىقدارلاشتۇرۇلدى.بۇ زاپچاس ئاساسلىقى ئەلالاشتۇرۇلغان MP بۇففېر ، فېرمېنت ئارىلاشتۇرۇش قاتارلىقلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. بۇففېر ئېرىتمىسىدە Mg بار2+and dNTP.بۇنىڭدىن باشقا ، كونكرېت بولمىغان PCR كېڭەيتىشنى ئۈنۈملۈك چەكلىيەلەيدىغان ۋە كۆپ خىل qPCR ئىنكاسىنىڭ كۈچەيتىش ئۈنۈمىنى يۇقىرى كۆتۈرەلەيدىغان ئامىللار قوشۇلدى ، بۇ كۈچەيتمە ئۈنۈمگە كاپالەتلىك قىلالايدۇ ھەمدە كۆپ خىل كۈچەيتمە ئىنكاسلارنى ئېلىپ بارالايدۇ.DUTP / UDG سىستېمىسى ئايرودرومنىڭ بۇلغىنىش خەۋپىنىڭ ئۈنۈملۈك ئالدىنى ئېلىش ئۈچۈن قوشۇلدى.
زاپچاسلار
1. Buffer
2. ئېنزىم ئارىلاشمىسى
Specification
| Hot Start | ئىچىگە ئورنىتىلغان قىزىق باشلىنىش |
| بايقاش ئۇسۇلى | دەسلەپكى تەكشۈرۈش |
| PCR ئۇسۇلى | بىر قەدەم RT-qPCR |
| Polymerase | تاق DNA پولىمېراسى |
| ئەۋرىشكە تىپى | DNA |
ساقلاش شەرتلىرى
بۇ مەھسۇلات قۇرۇق مۇز بىلەن توشۇلغان بولۇپ ، -25 ~ -15 at دە 1 يىل ساقلىغىلى بولىدۇ.دائىم ئالدىنى ئېلىش كېرەكتوڭلىتىش.ئايرىم تېجەش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.
كۆرسەتمە
1.ئىنكاس سىستېما
| زاپچاسلار | ھەجىمى (μL) | Final Concentration |
| 2 × MP Buffer | 12.5 | 1 × |
| Enzyme Mix | 1 | - |
| Primer / Probe mix (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| قېلىپ RNA | 1-10 | - |
| RNase Free H2O | to 25 | - |
ئىزاھات:
ئىشلىتىشتىن بۇرۇن ياخشى ئارىلاشتۇرۇشقا كاپالەتلىك قىلىڭ ، زوراۋان تەۋرىنىش كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغان كۆپۈك كۆپۈكلەردىن ساقلىنىڭ.
a.دەسلەپكى قويۇقلۇقى: كۆپ خىل پرېسلاشنى ئۆز ئىچىگە ئالغان پىرىمېر ئارىلاشمىسى ، ئەھۋالغا ئاساسەن ئەڭ ياخشى دەسلەپكى قويۇقلۇقى بەلكىم 0.l بىلەن 1.0μM ئارىلىقىدا بولۇشى مۇمكىن.
b.تەكشۈرۈشنىڭ قويۇقلۇقى: كۆپ خىل تەكشۈرۈش ئەسۋابىنىڭ بەلگە پەرقى فلۇئورېسسېنسىيە گۇرۇپپىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان تەكشۈرۈش ئارىلاشمىسى ، ئەھۋالغا ئاساسەن ئەڭ ياخشى تەكشۈرۈش قويۇقلۇقى بەلكىم 0.05 بىلەن 0.5μM ئارىلىقىدا بولۇشى مۇمكىن.
c.قېلىپنى كېڭەيتىش: qPCR ئىنتايىن سەزگۈر بولۇپ ، قېلىپنى سۇيۇلدۇرۇش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.كونترول Ct قىممىتى 20 دىن 35 كىچە بولغان ئارىلىقتا ماس كېلىدۇ.
d.سىستېما تەييارلاش: دەرىجىدىن تاشقىرى پاكىز خىزمەت جەدۋىلىگە تەييارلىق قىلىڭ ، تۇرۇبا ۋە رېئاكسىيە تۇرۇبىسى يادرو قالدۇقى يوق.مىلتىق بېشىنى سۈزگۈچ ئېلېمېنتى بىلەن ئىشلىتىش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.كرېستتىن بۇلغىنىش ۋە ئايروسولدىن بۇلغىنىشتىن ساقلىنىڭ.
2. ئەلالاشتۇرۇلغان ۋېلىسىپىت مىنىشكېلىشىم
| دەۋرىيلىك step | Temp. | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
| تەتۈر كۆچۈرۈلۈش | 50 ℃a | 20mins | 1 |
| Initial-denaturation | 95 ℃ | 5 مىنۇت | 1 |
| كۈچەيتمە ئىنكاس | 95 ℃ | 15sec |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30sec c |
ئىزاھات:
a.تەتۈر كۆچۈرۈلۈش: تېمپېراتۇرا ° C 42 ياكى ° C50 نى تاللىيالايدۇ.
b.كۈچەيتمە ئىنكاسى: تېمپېراتۇرا لايىھىلەنگەن پىرىسلارنىڭ Tm قىممىتىگە ئاساسەن تەڭشىلىدۇ.
c.فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالىغا ئېرىشىش: تەجرىبە تەرتىپىنى ئەسۋاب قوللانمىسىنىڭ تەلىپىگە ئاساسەن تەڭشەڭ.
ئىزاھات
سالامەتلىكىڭىز ۋە بىخەتەرلىكىڭىزگە كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن تەجرىبىخانا چاپان ، پەلەي قاتارلىق زۆرۈر PPE نى كىيىڭ.
