Multiplex qPCR Probe Premix
مۈشۈك نومۇرى: HCB5051A
TaqMan كۆپ ئىقتىدارلىق qPCR Master Mix (بوياقنى ئاساس قىلغان) 2 × ھەقىقىي ۋاقىتتىكى مىقدارلاشتۇرۇلغان PCR كۈچەيتكۈچنىڭ ئالدىن ھەل قىلىش چارىسى بولۇپ ، يۇقىرى سەزگۈرلۈك ۋە خاسلىق بىلەن ئىپادىلىنىدۇ ، ئۇ كۆك رەڭدە بولۇپ ، ئەۋرىشكە قوشۇش رولىغا ئىگە.بۇ مەھسۇلات 2 × ئارىلاشما ئارىلاشما رېئاكتور بولۇپ ، يەككە رېئاكسىيەدە تۆت خىل فتور فېرمېنتلىق PCR ئىنكاسىنى قوزغىتالايدۇ.بۇ مەھسۇلات گېنى ئۆزگەرتىلگەن ئانتىتېلا ئۇسۇلىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان ئىسسىق قوزغىلىدىغان تاق ئېنزىمنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بولۇپ ، كۈچەيتىش سەزگۈرلۈكى ۋە خاسلىقىنى زور دەرىجىدە ئۆستۈرىدۇ.شۇنىڭ بىلەن بىر ۋاقىتتا ، بۇ مەھسۇلات كۆپ خىل رېئاكسىيەلىك بۇففېرنى چوڭقۇر ئەلالاشتۇردى ، بۇ ئىنكاسنىڭ كۈچەيتىش ئۈنۈمىنى ئۆستۈرۈپ ، تۆۋەن قويۇقلۇقتىكى قېلىپلارنىڭ ئۈنۈملۈك كۈچەيتىلىشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ.بۇ مەھسۇلاتنى گېن توپلاش ۋە كۆپ مەنبەلىك مىقدار ئانالىزىغا ئىشلىتىشكە بولىدۇ.
Specification
Hot Start | ئىچىگە ئورنىتىلغان قىزىق باشلىنىش |
بايقاش ئۇسۇلى | دەسلەپكى تەكشۈرۈش |
PCR ئۇسۇلى | qPCR |
Polymerase | تاق DNA پولىمېراسى |
ئەۋرىشكە تىپى | DNA |
ساقلاش شەرتلىرى
بۇ مەھسۇلات قۇرۇق مۇز بىلەن توشۇلغان بولۇپ ، -25 ~ -15 at دە 2 يىل ساقلىغىلى بولىدۇ.
كۆرسەتمە
1. ئىنكاسسىستېما
زاپچاسلار | ھەجىمى (μL) | Final Concentration |
2 × TaqMan كۆپ ئىقتىدارلىق qPCR Master Mix | 12.5 | 1 × |
Primer mix (10 μ mmol / L) a | × | 0.1 - 0.5 μ mmol / L. |
Probe mix (10 μmol / L)b | × | 50 - 250 nmol / L. |
Rox پايدىلىنىش بوياق | 0.5 | 1 × |
قېلىپ DNA / cDNA | 1-10 | - |
ddH2O | up to 25 | - |
ئىزاھات:ھەددىدىن زىيادە كۆپۈكنىڭ كۈچلۈك تەۋرىنىشىدىن ساقلىنىش ئۈچۈن ئىشلىتىشتىن بۇرۇن ئوبدان ئارىلاشتۇرۇڭ.
a.پىرىمېرنىڭ قويۇقلۇقى: Primer Mix دا بىر نەچچە جۈپ پىرىمېر بار ، ئادەتتە ھەر بىر قەغەزنىڭ ئاخىرقى قويۇقلۇقى 0.2 μ mmol / L بولۇپ ، مۇۋاپىق بولغاندا 0.1 دىن 0.5 μ mmol / L ئارىلىقىدا تەڭشىگىلى بولىدۇ.
b.تەكشۈرۈشنىڭ قويۇقلۇقى: تەكشۈرۈش ئارىلاشمىسىدا ئوخشىمىغان فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالى بار كۆپ خىل تەكشۈرۈش ئەسۋابى بار ، ھەر بىر تەكشۈرۈش ئەسۋابىنىڭ قويۇقلۇقىنى كونكرېت ئەھۋالغا ئاساسەن 50 دىن 250 nmol / L ئارىلىقىدا تەڭشىگىلى بولىدۇ.
1.Rox بوياق پايدىلىنىش ماتېرىيالى: ئۇ ئەمەلىي ۋاقىت PCR كۈچەيتىش ئەسۋابىدا قوللىنىلغان بىئولوگىيىلىك سىستېما قاتارلىق قۇدۇقلار ئارىسىدا ھاسىل بولغان فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالىنىڭ خاتالىقىنى تۈزىتىش ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ.بۇ مەھسۇلاتتا Rox بوياق پايدىلىنىش ماتېرىيالى يوق.ئەگەر لازىم بولسا Cas # 10200 تەۋسىيە قىلىنىدۇ.
2.قېلىپنى كېڭەيتىش: qPCR ئىنتايىن سەزگۈر ، ئىشلىتىش قېلىپىنى سۇيۇلدۇرۇش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.ئەگەر قېلىپ cDNA پاي ھەل قىلىش چارىسى بولسا ، قېلىپنىڭ ئومۇمىي ئومۇمىي مىقدارىنىڭ 1/10 دىن ئېشىپ كەتمەسلىكى كېرەك.
3.رېئاكسىيە سىستېمىسى: 25μL ، 30μL ياكى 50 μL نىشانلىق گېننىڭ كۈچەيتىلىشىنىڭ ئۈنۈمى ۋە تەكرارلىنىشىغا كاپالەتلىك قىلىش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.
4.سىستېما تەييارلاش: دەرىجىدىن تاشقىرى پاكىز ئورۇندۇقتا تەييارلىق قىلىڭ ، يادرو قالدۇقلىرى بولمىغان كۆرسەتمە ۋە ئىنكاس نەيچىلىرىنى ئىشلىتىڭ.كۆرسەتمىلەرنى سۈزگۈچ كارىدور بىلەن ئىشلىتىش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.كرېستتىن بۇلغىنىش ۋە ئايروسولدىن بۇلغىنىشتىن ساقلىنىڭ.
2.ئىنكاس پروگراممىسى
دەۋرىيلىك قەدەم | Temp. | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
Initial-denaturation | 95 ℃ | 5 مىنۇت | 1 |
Denaturation | 95 ℃ | 15sec | 45 |
Annealing / Extension | 60 ℃ | 30sec |
ئىزاھات:
1.تۇتاشتۇرۇش / كېڭەيتىش: لايىھىلەنگەن دەسلەپكى Tm قىممىتىگە ئاساسەن تېمپېراتۇرا ۋە ۋاقىتنى مۇۋاپىق تەڭشىگىلى بولىدۇ.
2.فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالىغا ئېرىشىش: ئوخشىمىغان qPCR بايقاش ئەسۋابلىرىغا ئېھتىياجلىق بولغان فلۇئورېسسېنسىيە سىگنالىنى سېتىۋېلىش ۋاقتى ئوخشىمايدۇ ، ئەڭ تۆۋەن ۋاقىت چەكلىمىسى بويىچە بېكىتىڭ.بىر نەچچە ئورتاق چالغۇنىڭ ۋاقتى تۆۋەندىكىچە:
20 سېكۇنت: قوللىنىشچان بىئولوگىيىلىك سىستېما 7700 ، 7900HT ، 7500 تېز
31 سېكۇنت: قوللىنىشچان بىئولوگىيىلىك سىستېما 7300
32 سېكۇنت: قوللىنىشچان بىئولوگىيىلىك سىستېما 7500
ئىزاھات
ساغلاملىقىڭىز ۋە بىخەتەرلىكىڭىزگە كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن كېرەكلىك PPE ، تەجرىبىخانا چاپان ۋە پەلەي كىيىڭ!