بىر قەدەم RT-qPCR SYBR يېشىل Premix
مۈشۈك نومۇرى: HCB5140A
بىر قەدەم RT-qPCR Syber Green Premix بولسا SYBR يېشىل I بوياقنى ئاساس قىلغان فلۇئورېسسېنسىيە مىقدارى ئۈچۈن.گېنغا خاس پىرىسلاش ، تەتۈر كۆچۈرۈلۈش ۋە qPCR رېئاكسىيەسى بىر تۇرۇبىدا تاماملىنىپ ، قايتا-قايتا دوپپا ئېچىش ۋە تۇرۇبا يولى مەشغۇلاتىنىڭ ئېھتىياجىنى يوقىتىپ ، تەكشۈرۈش ئۈنۈمىنى زور دەرىجىدە ئۆستۈرۈپ ، بۇلغىنىش خەۋپىنى تۆۋەنلىتىدۇ.RNA ئەۋرىشكىسى ئۈچۈن ، بۇ زاپچاستا ئۈنۈملۈك cDNA بىرىكتۈرۈش ئۈچۈن ئىسسىققا چىداملىق تەتۈر ترانسكرىپسىيە ۋە مىقدارنى كېڭەيتىش ئۈچۈن HotStart Taq DNA Polymerase ئىشلىتىلگەن.ئەلالاشتۇرۇلغان بۇففېر سىستېمىسى ئاستىدا ، زاپچاسنىڭ سەزگۈرلۈكى يۇقىرى ئىپادىلەنگەن نىشاننىڭ 0.1 pg ، ئوتتۇراھال ئىپادىلەنگەن نىشاننىڭ 1 pg گە يېتىدۇ.بۇ زاپچاس DNA ئەۋرىشكىسىنى كۆپەيتىش ۋە مىقدارلاشتۇرۇشقا ماس كېلىدۇ.ئۇ ئوخشىمىغان ئۆسۈملۈك ۋە ھايۋانلارنىڭ ئەۋرىشكىسى ، ھۈجەيرە ۋە مىكرو ئورگانىزملاردىكى يادرو كىسلاتاسىنى سەزگۈر بايقاش ۋە مىقدارلاشتۇرۇشقا ياردەم بېرىدۇ.
زاپچاسلار
| No | ئىسمى | ھەجىم | ھەجىم |
| 1 | Advanced Buffer | 250 μL | 2 × 1.25 mL |
| 2 | ئىلغار ئېنزىم ئارىلاشمىسى | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Free H.2O | 250 μL | 2 × 1.25 mL |
ساقلاش شەرتلىرى
بۇ مەھسۇلاتنى يورۇقلۇقتىن -25 ~ -15 at ئەتراپىدا ساقلاش كېرەك.
كۆرسەتمە
1. رېئاكسىيە سىستېمىسىنىڭ سەپلىمىسىd
| زاپچاسلار | ھەجىمى (μL) | ھەجىمى (μL) | ئاخىرقى مەركەزلىشىش |
| Advanced Buffer | 12.5 | 25 | 1 × |
| ئىلغار ئېنزىم ئارىلاشمىسى | 1 | 2 | - |
| Forward Primer (10 μ mmol / L)a | 0.5 | 1 | 0.2 mmol / L. |
| تەتۈر پىرىمېر (10 μ mmol / L)a | 0.5 | 1 | 0.2 mmol / L. |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Free H.2O.c | to 25 | to 50 | - |
ئىزاھات:
1) a.T.ئۇ ئەڭ ئاخىرقى دەسلەپكى قويۇقلۇقى 0.2 mmmol / L بولۇپ ، مۇۋاپىق بولغاندا 0.1 دىن 1 mm / L ئارىلىقىدا تەڭشىگىلى بولىدۇ.
2) b.رېئاكتور ئىنتايىن سەزگۈر ، ئومۇمىي RNA نىڭ دائىرىسى 1pg-1μg ، ئىنسانلارنىڭ ئەۋرىشكىسىنى سىناق قىلغاندا ئەڭ ياخشى كىرگۈزۈش 1 pg-100 ng بولۇپ ، Ct ئومۇمىي قىممىتىنى مۇۋاپىق ھالدا 15-30 ئارىلىقىدا كونترول قىلىدۇ.
3) c.20μL ياكى 50μL ئىشلىتىش ئارقىلىق نىشانلىق گېننىڭ كۈچەيتىلىشىنىڭ توغرىلىقى ۋە كۆپىيىشىگە كاپالەتلىك قىلىش تەۋسىيە قىلىنىدۇ.
4) d.دەرىجىدىن تاشقىرى پاكىز ئورۇندۇقتا تەييارلىق قىلىپ ، يادرو قالدۇق قالدۇقلىرى ۋە ئىنكاس نەيچىسى ئىشلىتىڭ.سۈزگۈچ كارىدورى بار كۆرسەتمىلەر تەۋسىيە قىلىنىدۇ.كرېستتىن بۇلغىنىش ۋە ئايروسولدىن بۇلغىنىشتىن ساقلىنىڭ.
2.ئىنكاس پروگراممىسى
| دەۋرىيلىك قەدەم | Temp. | ۋاقىت | ۋېلىسىپىت |
| تەتۈر كۆچۈرۈلۈش | 50 ℃a | 6mins | 1 |
| دەسلەپكى رەتلەش | 95 ℃ | 5 مىنۇت | 1 |
| كۈچەيتمە ئىنكاس | 95 ℃ | 15 سېكۇنت | 40 |
| 60 ℃b | 30 سېكۇنت | ||
| ئەگرى سىزىق | ئەسۋاب كۆڭۈلدىكى قىممىتى | 1 | |
ئىزاھات:
1) a.تەتۈر ترانسكرىپسىيە تېمپېراتۇرىسىنى تەجرىبە ئېھتىياجىغا ئاساسەن 50-55 ° C ئارىلىقىدا تاللىغىلى بولىدۇ.DNA ئەۋرىشكىسى ئۈچۈن ، تەتۈر كۆچۈرۈش جەريانىنى ئەمەلدىن قالدۇرغىلى بولىدۇ.
2) b.ئالاھىدە ئەھۋاللاردا دەسلەپكى Tm قىممىتىگە ئاساسەن تۇتاشتۇرۇش / كېڭەيتىش تېمپېراتۇرىسىنى تەڭشىگىلى بولىدۇ ، ° C 60 تەۋسىيە قىلىنىدۇ.
ئىزاھات
1. بۇ مەھسۇلات پەقەت تەتقىقات ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ.
2. بىخەتەرلىكىڭىز ئۈچۈن تەجرىبىخانا چاپان ۋە بىر قېتىم ئىشلىتىلىدىغان پەلەي بىلەن مەشغۇلات قىلىڭ.
